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赛库小课堂 | RPMI-8226细胞培养要点及注意事项
发布日期:2025.01.06
 

 

RPMI 8226细胞是1966年从一名61岁男性浆细胞瘤患者的外周血中分离的B淋巴细胞,可以产生免疫球蛋白轻链,没有证据表明细胞能产生重链(细胞质型或分泌型)。RPMI 8226细胞可用于3D细胞培养、免疫学和免疫系统研究,也是一种合适的转染宿主。

 
 

 

培养信息

 

推荐培养试剂

▶基础培养基:RPMI1640(改良型)(CellCook cat:CM2006)

▶血清:澳洲胎牛血清(CellCook cat:CM1003/CM1003L)

▶配套完全培养基(CellCook cat:CC1608M)

▶传代比例:1:3传代(培养面积比)

▶传代方式:离心收集(1000rpm,5min)

▶换液频率:2~3天换液1次

▶倍增时间:60 hours (PubMed=25984343); 33.5 hours (NCI-DTP); ~60-70hours (DSMZ)

▶冻存液配方:RPMI 1640(改良型)+10%澳洲胎牛血清+10%DMSO

▶难度等级:++

▶特征特性:来源于一位61岁的男性浆细胞瘤患者;可产生免疫球蛋白轻链,未检测到重链。

 

赛库参考图片

 

 

其他细胞库图片

 

 

生长特性及要点

 

1.细胞主要以悬浮的单细胞形式生长,大小不均一,偶有轻微聚团,静置培养后会有少量细胞贴壁,可在换液或传代时轻轻吹开,日常培养使用无TC处理的培养瓶;

2.本株细胞比较脆弱,碎片较普通悬浮细胞多,建议用澳胎培养;建议细胞密度维持在2×10^5个/ML~1×10^6个/ML,密度过低或者过高都容易造成细胞死亡,维持适高密度有利于细胞生长;

3.细胞倍增时间较长,生长速度相对较慢,日常培养按1:3比例传代大概3天可传一次,如果增殖活力不佳可通过竖置培养瓶或者适当补加血清进行培养;

4.细胞密度低的时候,尽量少动少离心,以减少对细胞的伤害;

5.在培养过程中可能会出现细胞碎片过多的情况,可以用低速离心去除(800rpm离心3min,低速离心会损失部分细胞,细胞密度过低和状态较差时需谨慎处理);

6.细胞冻存数量1x10^6 ~2x10^6个/ml/管,细胞刚复苏有一定恢复期,需要维持培养环境的稳定,静置培养24h后再观察细胞状态。

 

 
 
建系文献

Matsuoka Y, Moore GE, Yagi Y, Pressman D. Production of free light chains of immunoglobulin by a hematopoietic cell line derived from a patient with multiple myeloma. Proc Soc Exp Biol Med. 1967 Aug-Sep;125(4):1246-50. doi: 10.3181/00379727-125-32327. PMID: 6042436.

 

 

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