
巨噬细胞(macrophage,Mφ)是天然免疫系统特化的具有吞噬作用的细胞,是第一道防线的重要组成部分。Mφ参与细胞碎片和病原体的识别、吞噬和降解,并且在向T细胞提呈抗原以及诱导其他抗原呈递细胞表达共刺激分子等方面发挥作用。
Mφ的命运取决于各种环境条件,这些环境条件会引发典型的促炎M1极化或抗炎M2极化。M1或M2极化是一个精确调控的过程,包括几个关键的信号通路、转录表观遗传和转录后调控网络。Mφ通常存在于两个不同的亚群:
1) 经典激活或M1巨噬细胞:它们是促炎细胞,并被LPS单独或与Th1细胞因子(如IFN-γ,GM-CSF)联合极化,并产生促炎细胞因子,如白细胞介素-1β (IL-1β), IL-6, IL-12, IL-23和TNF-α;
2) 交替激活或M2型巨噬细胞:具有抗炎和免疫调节作用,被Th2细胞因子IL-4和IL-13极化,产生IL-10和TGF-β等抗炎细胞因子。
作为一种常用的巨噬细胞模型,RAW264.7 极化可模拟向 M1(促炎)或 M2(抗炎)表型分化,用于研究免疫应答、炎症疾病及药物作用机制。通过极化能明确细胞在不同微环境下的功能变化,为疾病病理机制和治疗靶点筛选提供体外研究基础。
M0(未极化)、M1(经典激活)和M2(替代激活)型巨噬细胞在细胞形态上具有相对显著的的区别,显微镜下可观察到以下特征:

lM0(静息状态):形态较规则、呈圆形或椭圆形、细胞直径中等(约10–15μm)、表面光滑、伪足稀疏且短。
lM1(促炎极化):明显增大(可达20μm以上)、形状不规则、伪足发达(宽板状伪足或丝状伪足)、细胞边缘呈“阿米巴样”皱褶、提示高运动性和吞噬活性。
lM2(抗炎/修复极化):大小介于M0与M1之间、形态更细长(纺锤形或星状)、伪足细长且分支多、类似成纤维细胞样外观、表面皱褶较少、整体伸展。
在科研界,RAW264.7 细胞可是出了名的难养—— 温度、pH 值稍有偏差就爱 “罢工”,尤其是血清质量,直接影响细胞的生长、分化和极化。毕竟血清里藏着生长因子、细胞因子、激素和营养成分…
为了进一步探究血清对RAW264.7 细胞的影响,我们找到市面热销的8款不同品牌、不同产地的胎牛血清,测试它们培养RAW264.7 的效果。

测试方法

将RAW264.7细胞以1×10⁵/孔接种于6孔板,分别使用8款血清(10%浓度,DMEM基础培养基)培养48小时(37℃、5% CO₂),通过显微镜(200X)观察细胞形态。

测试结果









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测试血清 |
培养48H后细胞状态 |
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血清①:CELLCOOK赛库血清 |
状态佳,细胞圆润,无极化 |
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血清② |
细胞状态良好,较少极化 |
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血清③ |
细胞状态一般,有极化现象 |
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血清④ |
细胞状态一般,极化较多 |
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血清⑤ |
状态佳,细胞圆润无极化 |
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血清⑥ |
状态佳,细胞圆润无极化 |
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血清⑦ |
细胞状态差,极化严重 |
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血清⑧ |
细胞状态差,极化严重 |
从结果来看,血清①赛库血清、血清⑤、血清⑥表现突出,细胞形态圆润,没有出现极化;其他血清会出现不同程度的细胞极化(红色圈为极化形态)。
要想 RAW264.7 细胞养的好,血清质量是绕不开的关键!实验前先试用不同血清,筛选出最适合的那一款,培养过程中尽量使用同一批次血清,能让你的细胞实验事半功倍。
























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