商品详情
【培养条件】
DMEM,high glucose(CellCook cat:CM2016,或同配方)10%胎牛血清CellCook cat:CM1002L,或更高级别)
配套完全培养基(CellCook cat:CC4003M/SCM-100-A/SCM-500-A)
【传代比例】
1:3-1:5传代(培养⾯积⽐)
【传代方式】
消化30秒
【换液频率】
2~3天换液1次
【难度等级】
++
【培养要点】
细胞贴壁性较差,容易飘起来,37℃静置可重新贴壁
【特征特性】
特征特性:293细胞中转⼊SV40T-antigen基因形成的⾼转衍⽣株,即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增,从⽽促进表达载体的扩增,促进蛋⽩的表达。293T细胞除了可⽤于各类基因表达及蛋⽩⽣产,还可⽤于⾼滴度逆转录病毒及其他病毒⽣产,如腺病毒及其他哺乳动物病毒。
【药筛】:通过慢病毒感染的⽅式将携带荧光的基因⽚段整合进细胞基因组,使细胞表达荧光蛋⽩,在荧光显微镜下可以进⾏观察,标记后的细胞⾮常容易进⾏追踪检测。由于是⽤慢病毒转染的⽅式,导致细胞荧光表达量的不确定性,为增强细胞荧光表达量可进⾏抗性筛选。
荧光株培养条件与野⽣型细胞⼀致。正常培养过程中定期(⼀个⽉2-3次或频率⾃定)⽤终浓度4μg/mL的嘌呤霉素追加筛选,冻存后复苏也建议可以追加筛选⼀次,不需要培养过程中每天都加药。